上海飛測生物為您提供食品安全、動(dòng)物疾病、微生物及毒素、環(huán)境污染監(jiān)測等領(lǐng)域的抗原抗體,同時(shí)我們擁有專業(yè)的抗原抗體制備技術(shù)團(tuán)隊(duì),為您提供一站式抗原抗體制備服務(wù)。我們提供的抗體服務(wù)包括:多克隆抗體制備、單克隆體制備、抗體純化等。歡迎來電咨詢!
一、多克隆抗體制備服務(wù)流程
動(dòng)物免疫(宿主動(dòng)物可提供兔、羊、雞、小鼠) |
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設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案 |
客戶有特殊需求,需提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求 |
2-3工作日 |
免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
分為三到四次免疫,Elisa檢測即時(shí)效價(jià) |
6-12周 |
微測Elisa檢測 |
以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價(jià)1:10000以上 |
1周 |
客戶檢測 |
自行設(shè)計(jì)檢測方案 |
1周 |
合格,抗體及技術(shù)服務(wù)報(bào)告交付客戶;不合格,服務(wù)停止; |
二、單克隆抗體制備服務(wù)流程
第一階段:免疫小鼠 |
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設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案 |
客戶有特殊需求,需提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)要求 |
2工作日 |
免疫實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 |
5只6-8周齡BALB/C小鼠,Elisa檢測即時(shí)效價(jià) |
7-8周 |
Elisa檢測 |
以免疫原為抗原樣品,保證Elisa檢測效價(jià)1:10000以上 |
1周 |
第二階段:單克隆雜交瘤細(xì)胞株的建立 |
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細(xì)胞融合 |
取小鼠的脾細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,篩選陽性克隆 |
2-3周 |
克隆擴(kuò)增和初選 |
擴(kuò)增并低溫保存一個(gè)成功融合的產(chǎn)物 |
1周 |
亞克隆 |
有限稀釋法亞克隆至形成穩(wěn)定的單克隆融合細(xì)胞株 |
4-6周 |
抗體鑒定(依據(jù)訂單要求) |
測定上清抗體亞型、特異性、抗體中和反應(yīng)性及抗體配對參數(shù) |
1-4周 |
腹水制備/轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng) |
依據(jù)客戶要求,提供不同種類服務(wù) |
4-6周 |
抗體純化 |
利用Protein A親和純化 |
1周 |
第三階段:單克隆雜交瘤細(xì)胞株的驗(yàn)收 |
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提供的雜交瘤培養(yǎng)物的腹水(或上清液)與顧客方提供的抗原樣品有特異性結(jié)合,同時(shí)抗體特異性只針對客戶方提供的抗原樣品做出保證 |
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第四階段:單克隆雜交瘤細(xì)胞株的交付 |
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2-3株雜交瘤細(xì)胞株和少量腹水(或上清液),需要純化的訂單會(huì)依據(jù)訂單要求提供純化后抗體,并給出相應(yīng)的鑒定報(bào)告(包括單抗的亞型) |
三、抗體純化服務(wù)流程
抗原親和純化 |
使用抗原偶聯(lián)Sepharose 4B制備抗原親和純化層析柱,僅捕獲針對抗原的特異性抗體,純化得到的抗體產(chǎn)物純度高到90%以上,特異性強(qiáng)、靈敏度高,能明顯減低背景信噪干擾,是抗體純化中最佳的實(shí)驗(yàn)方法之一 |
1-2周 |
Protein A/G純化 |
特異性的捕獲樣品中的IgG,性價(jià)比較高,特別適用于大規(guī)模樣品的純化 |
1-2周 |
飽和硫酸銨沉淀法純化 |
分離所有的免疫球蛋白,得率最高,但特異性和靈敏度偏低,僅適用于定性分析 |
1周 |